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一、技術(shù)簡介CLIP(Cross-linkingimmunoprecipitation，交聯(lián)免疫共沉淀）通過結(jié)合UV交聯(lián)和免疫共沉淀的方法來分析蛋白與RNA相互作用的結(jié)合位點。二、技術(shù)原理CLIP技術(shù)利用紫外線照射使細胞內(nèi)的RNA與RNA結(jié)合蛋白（RBP）發(fā)生共價交聯(lián)，隨后通過免疫沉淀的方法富集與特定RBP結(jié)合的RNA片段，再經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄和高通量測序等步驟，獲取RBP在體內(nèi)的RNA結(jié)合位點和結(jié)合序列信息。三、應(yīng)用場景1.蛋白質(zhì)-RNA相互作用研究：確定特定蛋白質(zhì)在體內(nèi)的RNA結(jié)...

一、技術(shù)簡介RIP（RNAImmunoprecipitation，RNA免疫沉淀）技術(shù)是一種用于研究細胞內(nèi)RNA與蛋白質(zhì)相互作用的關(guān)鍵實驗方法，能夠揭示RNA結(jié)合蛋白（RBP）在轉(zhuǎn)錄后調(diào)控中的功能機制。二、技術(shù)原理RIP利用針對目標蛋白的抗體把相應(yīng)的RNA-蛋白復(fù)合物沉淀下來，通過分離純化，對結(jié)合在復(fù)合物上的RNA進行RT-PCR驗證或測序分析，結(jié)果更具生物學(xué)說服力。三、應(yīng)用場景1.基礎(chǔ)機制：解析RNA結(jié)合蛋白（如AGO2、Polycomb復(fù)合物）的功能及RNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。2....

一、技術(shù)簡介ChIP（染色質(zhì)免疫共沉淀）是一種研究蛋白質(zhì)與DNA相互作用的關(guān)鍵技術(shù)，廣泛應(yīng)用于轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點鑒定、表觀遺傳修飾分析等領(lǐng)域。二、技術(shù)原理利用抗原抗體的特異性結(jié)合，將與目的蛋白相結(jié)合的DNA片段沉淀下來，能夠真實地反映結(jié)合在DNA序列上的調(diào)控蛋白。三、應(yīng)用場景1.轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究：鑒定轉(zhuǎn)錄因子（如p53、NF-κB）的DNA結(jié)合位點。2.表觀遺傳學(xué)：分析組蛋白修飾（如H3K27me3）在基因沉默中的作用。3.疾病機制：探索癌癥中異常蛋白（如MYC）的基因組結(jié)合模式。...

一、技術(shù)簡介IP（免疫沉淀，Immunoprecipitation）和Co-IP（免疫共沉淀，Co-Immunoprecipitation）是研究蛋白質(zhì)功能及相互作用的核心技術(shù)，廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)和細胞生物學(xué)領(lǐng)域。二、技術(shù)原理IP通過特異性抗體與目標蛋白結(jié)合，利用抗體將靶標蛋白（即抗原）分離出來，從而檢測某一種蛋白的表達情況；而CO-IP是在IP基礎(chǔ)上，驗證蛋白質(zhì)間的相互作用。通過捕獲一個蛋白（誘餌蛋白），檢測與其結(jié)合的互作蛋白（靶蛋白），從而特異性富集所研究的目的蛋白，進...

在細胞生物學(xué)研究、生物制藥等前沿領(lǐng)域，細胞培養(yǎng)基為細胞生長繁衍提供關(guān)鍵養(yǎng)分與適宜環(huán)境。掌握其正確使用方法，才能讓細胞蓬勃生長，助力科研突破與產(chǎn)業(yè)革新。開啟培養(yǎng)前，依據(jù)細胞種類、實驗?zāi)康暮Y選培養(yǎng)基，如貼壁生長的癌細胞系多用含血清、葡萄糖、氨基酸及多種生長因子的RPMI-1640培養(yǎng)基；原代細胞培養(yǎng)常選營養(yǎng)成分豐富、成分貼近體內(nèi)環(huán)境的DMEM培養(yǎng)基，且需添加適量抗生素，像青霉素、鏈霉素，防止微生物“偷襲”，搭建安全“保育箱”。配制環(huán)節(jié)嚴格按說明書稱取培養(yǎng)基粉末，溶解于超純水中，用...

原代心肌細胞間質(zhì)并非單一物質(zhì)，而是由多種成分巧妙交織而成的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)。其中，膠原蛋白是極為重要的組成部分。它如同堅韌的繩索，為心肌細胞提供穩(wěn)固的支撐框架。在心臟每一次有力的搏動中，膠原蛋白承受著巨大的機械應(yīng)力，確保心肌細胞不會因過度拉伸或扭曲而受損，維持著心臟結(jié)構(gòu)的完整性，使其能夠在漫長的生命周期中持續(xù)穩(wěn)定地工作。彈性纖維也在其中扮演著重要角色。它們賦予心肌組織一定的彈性和回縮力。當心臟收縮時，彈性纖維被拉伸儲存能量；而當心臟舒張時，又能釋放能量輔助心臟恢復(fù)到原來的形狀，讓心臟...

在生命科學(xué)的微觀世界里，細胞凋亡檢測對剖析疾病機理、研發(fā)藥物至關(guān)重要。諸多檢測方法各展其長，共同揭開凋亡神秘面紗。形態(tài)學(xué)觀察是基礎(chǔ)“視窗”。光學(xué)顯微鏡下，經(jīng)特定染色（如吉姆薩染色），凋亡細胞體積縮小、核質(zhì)濃縮，與周圍正常細胞形成鮮明對比；熒光顯微鏡利用霍echst等染料，讓凋亡細胞核亮起藍白熒光，呈致密塊狀或碎片狀，直觀呈現(xiàn)細胞形態(tài)異變，為初步判斷提供依據(jù)。電子顯微鏡則更進一步，超高倍放大下，清晰可見凋亡細胞膜出芽、氣泡狀結(jié)構(gòu)，線粒體腫脹皺縮，從細微處洞察凋亡特征。生化檢測聚...

在生命科學(xué)與醫(yī)學(xué)研究的廣袤領(lǐng)域中，耐藥細胞株的建立吸引著眾多科研工作者深入探尋。這一過程不僅涉及復(fù)雜的細胞生物學(xué)機制，更關(guān)乎對疾病本質(zhì)的深刻理解以及新藥研發(fā)的希望曙光。耐藥細胞株的建立往往始于對特定藥物敏感的細胞群體。這些細胞在適宜的培養(yǎng)環(huán)境下生長繁殖，如同一個訓(xùn)練有素的軍團，遵循著既定的生命規(guī)律。然而，當持續(xù)暴露于逐漸增加濃度的藥物環(huán)境中時，藥物如同洶涌的潮水，不斷沖擊著細胞的生存防線，而細胞則在這場生存挑戰(zhàn)中開始發(fā)生微妙的變化。起初，部分細胞憑借自身固有的一些隨機突變或特...

在生命科學(xué)的浩瀚海洋中，細胞作為生命的基本單元，承載著無盡的奧秘與可能。為了深入探索這些微小世界的規(guī)律，科學(xué)家們常常需要對特定的細胞進行追蹤、觀察和研究。此時，標記細胞株便成為了他們手中的“精準指南針”。這是通過特定的方法將某種標記物引入細胞株中，使其能夠被準確地識別和追蹤。這種標記物可以是熒光蛋白、抗體、磁性微粒等，它們各自具有性質(zhì)和優(yōu)勢，能夠滿足不同實驗需求。細胞株的作用首先體現(xiàn)在細胞追蹤與定位上。在復(fù)雜的生物體內(nèi)或細胞培養(yǎng)環(huán)境中，特定細胞的行蹤往往是科研人員關(guān)注的焦點。...

在醫(yī)學(xué)和生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域，耐藥細胞株的出現(xiàn)無疑是一個令人矚目的挑戰(zhàn)。這些細胞株因長期暴露于藥物環(huán)境中而逐漸產(chǎn)生了對藥物的耐受性，使得原本有效的藥物在它們面前失去了威力，為疾病的治療帶來了重重困難。耐藥細胞株的形成是一個復(fù)雜而多樣的過程。細胞在藥物的持續(xù)壓力下，可能通過基因突變、基因表達改變、藥物外排泵的激活等多種機制，逐漸獲得了對藥物的抗性。這些耐藥細胞不僅能夠在藥物存在的環(huán)境中存活，甚至還能增殖，將耐藥性傳遞給后代細胞，從而形成穩(wěn)定的耐藥細胞株。這種耐藥性的出現(xiàn)，往往與藥物...

原代細胞的應(yīng)用領(lǐng)域廣泛，主要包括以下幾個方面：一、基礎(chǔ)研究1、分子生物學(xué)和細胞生物學(xué)研究：原代細胞保留了體內(nèi)原始組織的生物學(xué)特征，如生長和衰老等特性，是研究基因功能、蛋白質(zhì)組學(xué)、基因組學(xué)、細胞株（系）研究、DNA、RNA和遺傳學(xué)研究等的理想模型，可幫助科學(xué)家更準確地了解細胞在生理狀態(tài)下的分子機制和生命活動規(guī)律。2、疾病機理研究：通過原代細胞建立的疾病模型，能夠更好地模擬疾病的發(fā)生發(fā)展過程，有助于深入研究疾病的發(fā)病機制。例如，利用原代肝細胞研究肝炎、肝硬化等肝臟疾病的發(fā)病機制；...

細胞培養(yǎng)基的主要類型包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基、無血清培養(yǎng)基以及化學(xué)成分確定的培養(yǎng)基等。以下是這些培養(yǎng)基類型的具體介紹：1、基礎(chǔ)培養(yǎng)基定義與特點：基礎(chǔ)培養(yǎng)基是一種合成培養(yǎng)基，其成分模仿天然培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分，通過化學(xué)物質(zhì)模擬合成。這類培養(yǎng)基通常含有氨基酸、碳水化合物、無機鹽、維生素及其他輔助成分。適用細胞類型：基礎(chǔ)培養(yǎng)基適用于多種已建立的細胞系和不同地方的哺乳動物細胞類型的培養(yǎng)。。2、無血清培養(yǎng)基定義與特點：無血清培養(yǎng)基不含動物源成分，旨在支持體外細胞的生長和維持，而無需補充血清。這類培...